The Ototoxicity of Chloroquine and Hydroxychloroquine: A Systematic Review

Abstract Introduction Chloroquine and hydroxychloroquine are antimalarial drugs widely used in the treatment of rheumatic diseases. With the global pandemic caused by the new coronavirus, there was an increase in the prescription of these drugs, which led to a major concern regarding their ototoxic effects. Objectives The objective of the present study was to assess existing scientific evidence about the toxic effects of chloroquine and hydroxychloroquine on the peripheral and/or central auditory system. Data Synthesis A systematic literature review was performed by searching the PubMed (Medline), Scopus, Web of Science, LILACS, and SciELO electronic databases, in a search of articles that fullfiled the predefined inclusion and exclusion criteria. The review was conducted in three phases and, in all of them, analyses were performed by two independent researchers. Disagreements were discussed with a third researcher until a consensus was reached. A total of 437 articles were found and 8 were included in this review. Seven of the included studies reported hearing loss in their samples and presented a diagnostic hypothesis of ototoxicity induced by chloroquine or hydroxychloroquine. The most common type of hearing loss was sensorineural, with varying laterality and degrees of severity. The most frequently used audiological test was pure tone audiometry, and only two studies assessed brainstem evoked responses. Conclusion The scientific evidence compiled in this research showed that chloroquine and hydroxychloroquine have an ototoxic effect in the peripheral auditory system. These drugs can cause cochlear damage, including changes in the stria vascularis and lesions in sensory hair cells.

Effects of subchronic inhalation exposure to an organophosphorus insecticide compound containing dichlorvos on wistar rats' otoacoustic emissions / Efeitos da exposição inalatória subcrônica a um inseticida organofosforado contendo diclorvos nas emissões otoacústicas de ratos Wistar

Abstract Introduction Considering that previous studies suggest that pesticides may cause hearing disorders in humans, as well as the lack of studies proving the specific mechanisms of injury and the difficulty of separating concomitant etiological factors of the hearing damage, such as noise and vibration, it is important to develop studies using animal models to elucidate the effects of exposure to those substances isolated from other hearing damage etiologies. Objective To evaluate if the exposure to a dichlorvos based organophosphorus insecticide may induce ototoxicity. Methods 36 male Wistar rats were assigned to 3 groups (12 rats/group): control (exposed to water), positive control (treated with cisplatin to induce hearing damage) and experimental (exposed to dichlorvos based organophosphorus insecticide). The amplitude of distortion product otoacoustic emissions in the frequencies of 4, 6, 8, 10 and 12 kHz was evaluated before and after exposure, as well as systemic toxicity signs, body mass gain and plasma cholinesterase. Open field and plus maze tests were performed in 24 rats: experimental (n = 8), control (n = 8) and positive control group (n = 8 introduced new rats to induce anxiolytic activity) to evaluate the locomotor activity and anxiety, respectively. Results There was no significant change in body mass gain and plasma cholinesterase in the dichlorvos based organophosphorus insecticide group, however, the animals showed transient piloerection, depression and dyspnea during exposure. The behavior was not affected in any group. The frequencies of 8 and 10 kHz were significantly affected bilaterally in the insecticide group, which also showed a significant difference of the control in 10 kHz on the right and 8 and 10 kHz on the left ear. Conclusion Subchronic inhalation exposure to dichlorvos based organophosphorus insecticide induced ototoxicity in the cochlear function of rats without relevant systemic toxicity.

Resumo Introdução Considerando que estudos anteriores sugerem que pesticidas podem causar distúrbios auditivos em humanos, além da falta de estudos que comprovem os mecanismos específicos de lesão e a dificuldade em separar fatores etiológicos concomitantes dos danos auditivos, como ruído e vibração, é importante desenvolver estudos que usem modelos animais para elucidar os efeitos da exposição a substâncias isoladas de outras etiologias de danos auditivos. Objetivo Avaliar se a exposição a um inseticida organofosforado baseado em diclorvos pode induzir ototoxicidade. Método Foram divididos em 3 grupos 36 ratos Wistar machos (12 ratos/grupo): controle (exposto à água), controle positivo (tratado com cisplatina para induzir dano auditivo) e experimental (exposto ao inseticida). A amplitude das emissões otoacústicas por produto de distorção nas frequências de 4, 6, 8, 10 e 12 kHz foi avaliada antes e após a exposição, bem como sinais de toxicidade sistêmica, ganho de massa corporal e colinesterase plasmática. Os testes Open Field e Plus Maze foram feitos em 24 ratos: experimental (n = 8), controle (n = 8) e grupo controle positivo (n = 8, introduziu novos ratos para induzir atividade ansiolítica) para avaliar a atividade locomotora e a ansiedade, respectivamente. Resultados Não houve alteração significativa no ganho de massa corporal e colinesterase plasmática no grupo experimental; entretanto, os animais apresentaram piloereção transitória, depressão e dispneia durante a exposição. O comportamento não foi afetado em qualquer grupo. As frequências de 8 e 10 kHz foram significativamente afetadas bilateralmente no grupo exposto ao inseticida, o qual também mostrou uma diferença significativa do controle em 10 kHz na orelha direita e 8 e 10 kHz na orelha esquerda. Conclusão A exposição subcrônica inalatória de inseticida organofosforado baseado em diclorvos induziu ototoxicidade na função coclear de ratos sem toxicidade sistêmica relevante.

Ototoxicity of an association of insecticides compounds containing dichlorvos and cypermethrin in Wistar rats

ABSTRACT Purpose: to evaluate possible ototoxicity secondary to exposure to a combination of pesticides (dichlorvos and cypermethrin based insecticides). Methods: the Wistar rats were divided into 3 groups (12 animals per group): control (water), positive control for hearing damage (cisplatin) and experimental (exposed to dichlorvos and cypermethrin). The amplitude of distortion product otoacoustic emissions was assessed before and after the exposure. Systemic toxicity signs were also evaluated (clinical signs, weight gain and plasma cholinesterase). Wilcoxon test analyzed the post-exposure amplitudes compared to pre-exposure and Kruskal Wallis following Dunn's post hoc tests analyzed the amplitudes' variation. Normally distributed variables were evaluated by Student's t test. Results: body weight and plasma cholinesterase values were similar comparing the pre and post exposure in the experimental group. The control group did not manifest significant amplitude reduction of otoacoustic emissions between the pre and post evaluation. In the group exposed to cisplatin there was a significant reduction in amplitudes at 12 kHz on the right (p = 0.006; Wilcoxon) and 4 kHz on the left (p = 0.032; Wilcoxon). In the group exposed to pesticides, there was a significant reduction in the right ear at 4 kHz (p = 0.034; Wilcoxon) and 8 kHz (p = 0.019; Wilcoxon) and in the left ear at 4 kHz (p = 0.007; Wilcoxon), 6 kHz (p = 0.023; Wilcoxon), 8 kHz (p = 0.045; Wilcoxon) and 12 kHz (p = 0.028; Wilcoxon). Conclusion: there was ototoxicity in the experimental group, without a relevant systemic toxicity.

Ototoxicity of cypermethrin in Wistar rats / Ototoxicidade da cipermetrina em ratos Wistar

Abstract Introduction: This study presents the effect of cypermethrin on the cochlear function in Wistar rats post-subchronic inhalation exposure. Worldwide several pesticides are described as causing health disorders. Cypermethrin is currently one of the most commonly used, however, little is known about its harmful effects, especially related to hearing. Human studies have associated pesticides with hearing disorders, but they present limited conclusions due to the multiple factors to which the population is exposed, such as noise. Objective: Mimic human exposure to cypermethrin and to verify the effects on cochlear function. Methods: It is a subchronic inhalation animal study (6 weeks, 4 hours/day), using 36 male Wistar aged 60 day. Rats were randomly assigned into three groups: Control (12 rats exposed to inhalation of water); Positive Control for auditory lesion (12 rats administrated with 24 mg/kg intraperitoneal cisplatin); Experimental (12 rats exposed to inhalation of cypermethrin - 0.25 mg/L). Animals were evaluated by distortion product otoacoustic emissions pre- and post-exposure. Results: The frequencies of 8, 10 and 12 kHz in both ears (right p = 0.003; 0.004; 0.008 and left 0.003; 0.016; 0.005 respectively) and at frequencies 4 and 6 in the right ear (p = 0.007 and 0.015, respectively) in the animals exposed to cypermethrin resulted in reduction. Conclusion: Subchronic inhalation exposure to cypermethrin provided ototoxicity in rats.

Resumo Introdução: Este estudo apresenta o efeito da cipermetrina sobre a função coclear em ratos Wistar após exposição por inalação subcrônica. Em todo o mundo, vários pesticidas são descritos como causadores de distúrbios de saúde. A cipermetrina é atualmente um dos mais utilizados, porém pouco se conhece sobre seus efeitos deletérios, principalmente relacionados à audição. Estudos em humanos associaram pesticidas a alterações auditivas, mas apresentaram conclusões limitadas devido aos múltiplos fatores aos quais a população está exposta, como, por exemplo, o ruído. Objetivo: Mimetizar a exposição humana à cipermetrina e verificar os seus efeitos na função coclear. Método: Estudo de inalação subcrônica em animais (6 semanas, 4 horas/dia), 36 ratos machos Wistar com 60 dias. Os ratos foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: controle (12 ratos expostos à inalação de água); controle positivo para lesão auditiva (12 ratos com administração de 24 mg/kg de cisplatina intraperitoneal); e experimental (12 ratos expostos a inalação de cipermetrina - 0,25 mg/L). Os animais foram avaliados por emissões otoacústicas por produto de distorção, pré e pós-exposição. Resultados: As frequências de 8, 10 e 12 kHz em ambas as orelhas (direita p = 0,003; 0,004; 0,008 e esquerda 0,003; 0,016; 0,005 respectivamente) e frequências 4 e 6 na orelha direita (p = 0,007 e 0,015, respectivamente) apresentaram redução nos animais expostos à cipermetrina. Conclusão: A exposição subcrônica por inalação à cipermetrina resultou em ototoxicidade em ratos.

Modelos animais para avaliação auditiva: revisão de literatura / Animal models for hearing evaluations: a literature review

RESUMO O objetivo dessa revisão é delinear os modelos animais viáveis para a pesquisa pré-clínica auditiva, considerando suas características anatômicas, fisiológicas, vantagens e desvantagens. Foram consultadas as bases de dados Scielo, Pubmed e Periódicos Capes, utilizando descritores envolvendo audição, testes auditivos e espécies animais, individualmente e cruzados entre si. Foram lidos os resumos dos artigos encontrados nas bases de dados, com posterior seleção baseada nos critérios: artigos disponíveis em sua integridade, uso de modelos animais em procedimentos audiológicos que incluísse a descrição dos métodos de avaliação, as vantagens e/ou desvantagens do uso da espécie, publicados entre 1995 e 2016. Apesar da existência de modelos alternativos, os mamíferos são ainda amplamente utilizados em pesquisa. Constatou-se que os ratos, camundongos e cobaios são frequentemente utilizados e, além destes, ovelhas, coelhos e chinchilas. Os métodos para avaliação auditiva contemplam principalmente emissões otoacústicas por produto de distorção, potencial evocado auditivo de tronco encefálico e avaliação histológica, principalmente em roedores. A escolha do animal de experimentação para avaliação do sistema auditivo depende de fatores anatômicos, fisiológicos, econômicos, espaciais, psicossociais e do objetivo da avaliação.

ABSTRACT This review aims to outline which animal models are viable for preclinical hearing research, considering their anatomical and physiological characteristics, and their advantages and disadvantages of use. PubMed, Scielo, and Portal Periodicos Capes were consulted, using descriptors concerning hearing, hearing tests and animal species, individually and crossed with each other. The abstracts of the articles found in the databases were read, with subsequent selection based on the following criteria: free articles, use of animal models in audiological procedures that included the description of the evaluation methods, the advantages and/or disadvantages of using the species, and published between 1995 and 2016. Despite the existence of alternative models, mammals are still widely used in research. It has been found that rats, mice and guinea pigs are frequently used, and, in addition to these, sheep, rabbits and chinchillas. The methods for auditory evaluation mainly comprise distortion product otoacoustic emissions, brainstem auditory evoked potential and histological evaluation, especially in rodents. Choosing the experimental animal to evaluate the auditory system depends on anatomical, physiological, economic, spatial and psychosocial factors, and on the evaluation's objective.

Gender differences in biochemical markers and oxidative stress of rats after 28 days oral exposure to a mixture used for weight loss containing p-synephrine, ephedrine, salicin, and caffeine

ABSTRACT The association of p-synephrine, ephedrine, salicin, and caffeine in dietary supplements and weight loss products is very common worldwide, even though ephedrine has been prohibited in many countries. The aim of this study was to evaluate a 28-day oral exposure toxicity profile of p-synephrine, ephedrine, salicin, and caffeine mixture (10:4:6:80 w/w respectively) in male and female Wistar rats. Body weight and signs of toxicity, morbidity, and mortality were observed daily. After 28 days, animals were euthanized and blood collected for hematological, biochemical, and oxidative stress evaluation. No clinical signs of toxicity, significant weight loss or deaths occurred, nor were there any significant alterations in hematological parameters. Biochemical and oxidative stress biomarkers showed lipid peroxidation, and hepatic and renal damage (p < 0.05; ANOVA/Bonferroni) in male rats (100 and 150 mg/kg) and a reduction (p < 0.05; ANOVA/Bonferroni) in glutathione (GSH) levels in all male groups. Female groups displayed no indications of oxidative stress or biochemical alterations. The different toxicity profile displayed by male and female rats suggests a hormonal influence on mixture effects. Results demonstrated that the tested mixture can alter oxidative status and promote renal and hepatic damages.

RESUMO A associação de p-sinefrina, efedrina, salicina, e cafeína em suplementos alimentares e produtos para perda de peso é muito utilizada em todo o mundo, embora a efedrina tenha sido proibida em muitos países. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de toxicidade à exposição oral de 28 dias à associação de p-sinefrina, efedrina, salicina e cafeína (na proporção de 10:4:6:80 m/m respectivamente) em ratos Wistar machos e fêmeas. Diariamente, os animais foram observados quanto ao peso corporal, sinais de toxicidade, morbidade e mortalidade. Após 28 dias, os animais foram sacrificados e o sangue coletado para avaliações hematológicas, bioquímicas e de estresse oxidativo. Não se observaram sinais clínicos de toxicidade, tampouco perda significativa de peso, mortes, ou quaisquer alterações significativas nos parâmetros hematológicos. Biomarcadores do estresse oxidativo e bioquímicos mostraram peroxidação lipídica, danos renais e hepáticos (p < 0,05; ANOVA/Bonferroni) em ratos machos (100 e 150 mg/kg) e a redução (p < 0,05; ANOVA/Bonferroni) nos níveis de glutationa reduzida (GSH) em todos os grupos de machos tratados. Nas fêmeas, não houve indícios de estresse oxidativo, nem alterações bioquímicas. O diferente perfil de toxicidade entre os gêneros sugere influência hormonal nos efeitos de mistura administrada. A associação testada pode alterar o estado oxidativo e promover danos renais e hepáticos.

Differential susceptibility of BALB/c, C57BL/6N, and CF1 mice to photoperiod changes

Objective:Circadian disturbances common to modern lifestyles have been associated with mood disorders. Animal models that mimic such rhythm disturbances are useful in translational research to explore factors contributing to depressive disorders. This study aimed to verify the susceptibility of BALB/c, C57BL/6N, and CF1 mice to photoperiod changes.Methods:Thermochron iButtons implanted in the mouse abdomen were used to characterize temperature rhythms. Mice were maintained under a 12:12 h light-dark (LD) cycle for 15 days, followed by a 10:10 h LD cycle for 10 days. Cosinor analysis, Rayleigh z test, periodograms, and Fourier analysis were used to analyze rhythm parameters. Paired Student's t test was used to compare temperature amplitude, period, and power of the first harmonic between normal and shortened cycles.Results:The shortened LD cycle significantly changed temperature acrophases and rhythm amplitude in all mouse strains, but only BALB/c showed altered period.Conclusion:These findings suggest that BALB/c, the preferred strain for stress-induced models of depression, should also be favored for exploring the relationship between circadian rhythms and mood. Temperature rhythm proved to be a useful parameter for characterizing rhythm disruption in mice. Although disruption of temperature rhythm has been successfully documented in untethered mice, an evaluation of desynchronization of other rhythms is warranted.

Chemical constituents and pharmacological profile of Gunnera manicata L. extracts

Gunnera perpensa L. (Gunneraceae) is a native South African plant widely used in traditional medicine as an antibacterial and antifungal. In southern Brazil there is the native species called Gunnera manicata L. that also belongs to the Gunneraceae. Nevertheless, there is no information about chemical and pharmacological properties of South American Gunnera species. Therefore this study aimed at assessing the phytochemical and pharmacological profiles of aqueous and methanol Brazilian G. manicata extracts. The results showed that antimicrobial activity in an agar diffusion assay was effective against Staphylococcus aureus and Candida albicans . Phenolic compounds were investigated by liquid chromatography coupled with a tandem mass spectrometer (LC-MS/MS) and all extracts presented gallic acid and only the methanol extract obtained from the leaves exhibited hyperoside. Rutin, quercetin and chlorogenic acid were not found in the samples analysed. Total phenolic content was higher in methanol extract and total flavonoid content was low in all extracts. Antioxidant activity was evaluated by the 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH) radical test, and all samples presented good to moderate antioxidant activity. These results encourage complementary studies on the chemical composition of the plant extracts focusing on isolation and structure elucidation of their active compounds.

Gunnera perpensa L. (Gunneraceae) é uma planta nativa do sul da África utilizada na medicina tradicional como antibiótico e antifúngico. Gunnera manicata L. é uma planta nativa do sul do Brasil também da família Gunneraceae e, apesar disso, não há informações sobre suas propriedades químicas e farmacológicas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o perfil fitoquímico e farmacológico dos extratos aquoso e metanólico de G. manicata. Os resultados do ensaio microbiológico de difusão em ágar demonstraram que os extratos testados foram ativos contra Staphylococcus aureus e Candida albicans. A presença de compostos fenólicos foi investigada pela técnica de Cromatografia Líquida acoplada a espectrômetro de massas em Tandem (CL-EM/EM). Em todas as amostras analisadas verificou-se a presença de ácido gálico e somente o extrato metanólico das folhas apresentou hiperosídeo. Rutina, quercetina e ácido clorogênico não foram encontrados. O conteúdo total de compostos fenólicos foi maior nos extratos metanólicos e o conteúdo de flavonóides totais foi baixo em todos os extratos. A atividade antioxidante foi avaliada pelo teste da atividade do radical 2,2-diphenyl-1-picril-hidrazil (DPPH) e todas as amostras apresentaram boa a moderada atividade antioxidante. Esses resultados encorajam estudos complementares da composição química dos extratos com foco no isolamento e na elucidação estrutural dos compostos ativos.

Biological assessment (antiviral and antioxidant) and acute toxicity of essential oils from Drimys angustifolia and D. brasiliensis

The genus Drimys presents the widest geographical distribution of the Winteraceae family, which comprises seven genera and about 120 species. In Brazil, the genus is found from Bahia to Rio Grande do Sul and occur in two species, Drimys angustifolia Miers, and D. brasiliensis Miers, Winteraceae, popularly known as "casca-de-anta", characterized by the presence of flavonoids and essential oils. It is used in folk medicine as an antiscorbutic, stimulant, antispasmodic, anti-diarrheal, antipyretic, antibacterial, and against asthma and bronchitis, besides having insecticidal properties. In addition to the known biological activities, it is very important to explore new applications in the treatment of physiological disorders or diseases caused by parasites. Based on this information, in this study we propose to evaluate volatile oils of the species D. brasiliensis and D. angustifolia, as an antioxidant, using the model of the DPPH radical as an antiviral against human herpes virus type 1 (HSV-1) and acute toxicity in vivo. The two species were not able to reduce the DPPH radical and showed interesting antiviral activity, significantly reducing the virus titers in vitro assays. Regarding the in vivo toxicity in female Wistar rats, treatment with the two species showed interesting signs in animals such as salivation, ptosis, tremor, decreased motor activity. In addition the oils of D. brasiliensis to other signs, some animals showed increased urination and diarrhea.

Evaluation of anti-estrogenic or estrogenic activities of aqueous root extracts of Gunnera manicata L / Avaliação das atividades anti-estrogênicos ou estrogênica de raiz aquosa extraida de Gunnera manicata L

Gunnera perpensa (Gunneraceae) is an African plant widely used in traditional medicine. This species is known for its activity involving the female reproductive system, such as inducing or increasing labor, treating female infertility, expelling the placenta and/or preventing post-partum hemorrhage. These properties are probably due to (z)-venusol, a majoritary compound, and its action in conjunction with substances in the whole extract and other natural products. In southern Brazil, a native species Gunnera manicata L. that also belongs to Gunneraceae can be found. In spite of the traditional use of G. perpensa, there is no pharmacological and phytochemical information regarding the South American Gunnera species. Therefore, the aim of this study was to investigate the activity of Brazilian G. manicata aqueous extracts on the reproductive system of immature female Wistar rats through a uterotrophic assay and to verify the presence of (z)-venusol by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). Data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) and Bonferroni´s post-hoc test (p< 0.01). Results obtained shown that G. manicata extracts did not present in vivo anti or estrogenic activity. Furthermore, (z)-venusol compound was not found. This study represents the first preliminary screening done on the South American G. manicata species.

Gunnera perpensa (Gunneraceae) é uma planta de origem africana extensamente utilizada na medicina tradicional do país. Esta espécie é conhecida por suas atividades no sistema reprodutor feminino, como indução ou aumento do trabalho de parto, tratamento da infertilidade em mulheres, expulsão da placenta e/ou impedimento de hemorragia pós-parto. Tais atividades devem-se, provavelmente, ao sinergismo existente entre o (z)-venusol, composto majoritário, e outros compostos presentes na planta. No sul do Brasil, encontra-se uma espécie nativa, Gunnera manicata L., pertencente à família Gunneraceae. Apesar do uso tradicional de G. perpensa, não há informações farmacológicas e fitoquímicas a respeito da espécie sul Americana de Gunnera. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar a atividade de extratos aquosos da espécie brasileira G. manicata no sistema reprodutor de ratas Wistar imaturas através de ensaio uterotrófico e verificar a presença do composto (z)-venusol utilizando-se cromatografia líquida acoplada a espectrômetro de massas em tandem (CL-EM/EM). Para a análise estatística, utilizou-se ANOVA/Bonferroni (p<0,01). Os resultados obtidos demonstraram que os extratos de G. manicata testados não apresentaram atividade anti ou estrogênica in vivo. Na análise química não foi verificada a presença do composto (z)-venusol. Este estudo representa o primeiro screening realizado com a espécie sul-americana G. manicata.

Study of acute toxicity and investigation of the presence of β-N-methylamino-L-alanine in the Gunnera manicata L. a species native to Southern Brazil / Estudo da toxicidade aguda e investigação da presença de β -N-metilamino-L-alanina no manicata Gunnera L. uma espécie nativa sul do Brasil

Gunnera (Gunneraceae) forms a complex association with the cyanobacterium Nostoc puctiforme L. Gunnera-Nostoc symbiosis is the only one reported involving a flowering plant, and results in the formation of the neurotoxic amino acid β-N-methylamino-L-alanine (BMAA). The species Gunnera manicata L., for which phytochemical, pharmacological and toxicological studies are lacking, is found in Southern Brazil. Therefore, acute toxicity and the presence of neurotoxic amino acid were investigated in aqueous extracts of G. manicata. The acute toxicity test was conducted by administering aqueous root extract of G. manicata at a concentration of 2000 mg/kg in a single dose orally to Wistar rats. Lethality was monitored daily for 14 days after treatment. The relative mass of organs was analyzed by one-way ANOVA and macroscopic changes were investigated. The analysis of BMAA, a procedure performed by GC/MS, involved a preliminary derivatization step. The ESI-MS/MS analysis was done by direct infusion. The present study demonstrated absence of neurotoxin in the samples of G. manicata analyzed and absence of acute toxicity in aqueous root extracts. These data confirm that extracts from the roots of G. manicata have a high margin of drug safety.

Gunnera (Gunneraceae) forma uma complexa associação com a cianobactéria Nostoc puctiforme L. A simbiose Gunnera-Nostoc é a única relatada envolvendo uma angiosperma e, em decorrência desta, ocorre a formação da neurotoxina β-N-metilamino-L-alanina (BMAA). No sul do Brasil, encontra-se a espécie G. manicata L., da qual não constam, na literatura científica, estudos fitoquímicos, farmacológicos e toxicológicos. Assim, o presente estudo avaliou a toxicidade aguda e a presença da neurotoxina BMAA em extratos aquosos de G. manicata. O ensaio de toxicidade aguda foi realizado com extrato aquoso das raízes de G. manicata na concentração de 2000 mg/kg, administrado em dose única via oral em ratos Wistar. Letalidade foi observada diariamente durante 14 dias pós-tratamento. Após a eutanásia, a massa relativa dos órgãos foi analisada por ANOVA de uma via e investigou-se a presença de alterações macroscópicas. A análise do BMAA por CG/EM envolveu uma etapa preliminar de derivatização, já a análise por ESI-EM/EM foi realizada por infusão direta. O presente estudo demonstrou a ausência da neurotoxina nas amostras de G. manicata analisadas bem como a ausência de toxicidade aguda no extrato aquoso das raízes. Esses dados demonstram alta margem de segurança dos extratos testados.

Susceptibility and morbidity between male and female Swiss mice infected with Angiostrongylus costaricensis: Susceptibilidade e morbidade entre camundongos Swiss machos e fêmeas infectados com Angiostrongylus costaricensis

The gender of vertebrate hosts may affect the outcome of parasitic infections. An experimental murine infection with Angiostrongylus costaricensis was followed with determinations of body weight, fecal larval elimination, number and length of adult worms, number of macroscopic intestinal lesions, and mortality. Groups of male and female Swiss mice were infected with 10 3rd-stage A. costaricensis larvae per animal. The results indicate there are no significant differences related to gender of the host, except for higher length of worms developed in male mice.

O sexo dos hospedeiros vertebrados pode influenciar no resultado de infecções parasitárias. A infecção experimental de camundongos com Angiostrongylus costaricensis foi acompanhada com observação do peso corporal, eliminação de larvas nas fezes, número e comprimento dos vermes adultos, número de lesões macroscópicas nos intestinos e mortalidade. Grupos de camundongos Swiss machos e fêmeas foram infectados cada um com 10 larvas de terceiro estágio de A. costaricensis. Os resultados indicam que não há diferenças significativas relacionados ao sexo dos hospedeiros, exceto pelo maior comprimento dos vermes nos hospedeiros machos.

Intoxicação em cães e gatos: diagnóstico toxicológico empregando cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta pressão com detecção ultravioleta em amostras estomacais / Intoxication in dogs and cats: toxicological diagnosis using thin layer chromatography and high pressure liquid chromatography with ultraviolet detection in stomach samples

Agrotóxicos e raticidas são responsáveis por inúmeras intoxicações humanas e animais. Dados preliminares sugerem que o uso ilegal desses compostos com a finalidade de intoxicação fatal em pequenos animais é uma prática comum na região central do Estado do Rio Grande do Sul. O Laboratório de Toxicologia (LATOX) recebe amostras de casos em que a principal suspeita é a intoxicação por agrotóxicos ou raticidas (lícitos e ilícitos). O presente estudo teve como objetivo apresentar um levantamento das intoxicações de pequenos animais, analisadas pelo LATOX no período de 2004 a 2008, sendo identificados os xenobióticos por meio de métodos analíticos otimizados pelo laboratório, incluindo screening por cromatografia em camada delgada (CCD) e possível confirmação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-UV). No período, foram analisadas 68 amostras oriundas de intoxicações em cães e gatos. As amostras biológicas analisadas foram o estômago e o conteúdo estomacal, das quais a CCD permitiu a identificação de carbamatos, warfarina e estricnina. Esta mostrou ser uma técnica qualitativa eficiente e adequada para esse propósito, além de ser relativamente rápida, de baixo custo e de sofrer pouca interferência de componentes da matriz. Também foi realizado um screening toxicológico por CLAE-UV para os carbamatos n-metilados: aldicarb, carbaril, carbofuran e propoxur. O resultado das análises indicou que o principal agente tóxico encontrado foi o aldicarb (chumbinho), responsável por 39,7 por cento das intoxicações (27 casos), seguido por estricnina (seis casos), warfarina (três casos) e monofluoracetato de sódio (um caso). Sendo assim, o "chumbinho" foi o principal agente envolvido em intoxicações de cães e gatos na região central do Estado no período avaliado, e os métodos analíticos CCD e CLAE-UV podem ser utilizados de forma eficiente na rotina laboratorial para identificação e confirmação dos xenobióticos mais envolvidos nessas intoxicações.

The pesticides and rodenticides are responsible for several human and animal intoxications. Preliminary data suggest that the illegal use of these compounds to poison small animals is a common practice in the central region of the Rio Grande do Sul state. The Laboratory of Toxicology received samples, of cases in which the main suspected cause of death is poisoning by pesticides or exogenous rodenticides (licit and illicit). The aim of this study was show the survey of small animals poisoned and analyzed by LATOX during the period of 2004 to 2008 identifying the xenobiotics by optimized analytical methods, including screening by thin-layer chromatography (TLC) and a possible confirmation by high performance liquid chromatography - ultraviolet detection (HPLC-UV). In this period 68 samples were analyzed from small poisoned animals. The biological samples analyzed were stomach and stomach content and the TLC permitted carbamates, warfarin and stricnine identification. This proved to be an efficient and adequate technique for this purpose, relatively fast, inexpensive and with low matrix interference. The screening by HPLC for N-methyl carbamates was also realized: aldicarb, carbaryl, carbofuran and propoxur. The analysis showed that the main toxic agent found was aldicarb (chumbinho), responsible for 39.7 percent of poisoning (27 cases), followed by stricnine (6 cases), warfarin (3 cases) and sodium monofluoracetate (1 case). Thus, the 'chumbinho' was the main agent involved in dogs and cats poisoning in the central region of the state, during the analyzed period. The analytical methods TLC and HPLC can be used efficiently in laboratorial routine for identification and confirmation of xenobiotics involved in these poisonings.

Chemical and anti-ulcer evaluation of Jodina rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek extracts / Estudo químico e da atividade antiúlcera de Jodina rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek

Jodina rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek (Santalaceae) is a medicinal plant popularly used as an anti-ulcer medicine. The plant native from Southern Brazil was chemically investigated and tested for its in vivo gastric anti-ulcer property by chloride acid/ethanol model. The chromatographic analysis of the hydroethanol extract of its leaves revealed the presence of C-glycosylflavonoids. From the n-butanol fraction of the hydroethanol extract of its aerial parts, vicenin-2 was isolated as the main component and identified by spectroscopic methods; and, a direct comparison with authentic samples was made. This fraction afforded three other C-glycosylflavonoids: vitexin, orientin and swertisin; all of them identified by direct comparison with authentic samples. We found that the oral administration of aqueous and hydroethanolic extracts led to a significant decrease in the ulcer index.

Jodina rhombifolia (Hook. & Arn.) Reissek (Santalaceae) é uma espécie vegetal nativa do Sul do Brasil e usada externamente na medicina popular para o tratamento de úlcera na pele. Neste trabalho foi estudada a atividade antiúlcera gástrica em ratos usando como indutor ácido clorídrico/etanol. Os extratos hidroetanólico e aquoso apresentaram atividade antiúlcera no modelo utilizado. A análise cromatográfica do extrato hidroetanólico das folhas indicou a presença de C-glicosilflavonóides. Da fração n-butanólica obtida por extração seqüencial do extrato hidroetanólico foi isolada e identificada por métodos espectroscópicos a vicenina-2 como substância majoritária. Desta fração também foram identificados por CCD bidimensional, com auxílio de substâncias de referência, outros três C-glicosídeos: vitexina, orientina e swertisina.

Efeitos da ivermectina (Ivomec® 1 por cento injetável) administrada a ratas Wistar durante o período de organogênese / Effects of the endectocid ivermectin (Ivomec(r) 1 percent injection) on pregnants females wistar rats

Avaliou-se a segurança da ivermectina (IVOMEC 1 por cento injetável), um fármaco muito utilizado, administrado a ratas prenhes, no início da fase organogênica, em dosagem até 60 vezes superior (12mg/kg) a utilizada para o tratamento de escabiose em caninos e felinos. Os resultados revelaram ausência de toxicidade sistêmica e reprodutiva, fundamentados na ausência de alterações no desenvolvimento ponderal, consumo de água e ração, absorções embrionárias, massa relativa e exame histopatológico dos órgãos das ratas prenhes, bem como na massa corporal, vitalidade dos fetos, número de fetos por fêmea e alterações macroscópicas externas. Conclui-se pela segurança da ivermectina, quando administrada, em dose única, no início da fase de organogênese de ratas prenhes.